pcr反应的三个步骤

文／王淑慧图／俞波王淑慧
新型冠状病毒肺炎疫情持续蔓延，在全民战“疫”的日子里，我们每天关注疫情动态，但鲜有人知的是那些离病毒最近的“福尔摩斯”们。
下面，就跟着汪海波博士走进拱北海关保健中心实验室，看看他们是如何利用核酸“擒凶”的。
01 接样本
2月6日下午2:05，港珠澳大桥海关送来高风险旅客的取样样本。病毒样本放置在专用运输箱内，汪博士走到门口接过样本。

02 打开样本前的步骤
打开样本前，必须做好全方位的防护。在实验室的洁净室，汪博士穿上隔离衣、防护服、防护口罩、护目镜、面屏、双层医用乳胶手套、防水靴套，每个步骤都不能有错。
03 核对样本信息
进入实验室核心区后，先用75%酒精对送样箱进行外表面消毒，消毒完毕后核对被检样本姓名、性别、年龄、编号等信息。

04 样本灭活
接下来就是进行最“凶险”的操作——样本灭活，使样本不具有传染性，同时提取病毒核酸。
05 PCR反应体系配制
走出核心实验区，开始进行PCR反应体系配制，将提取的病毒核酸加入到核酸扩增检测试剂中。

06 放置在ABI7500荧光定量PCR仪上
然后，将配制好的PCR反应物放置在ABI7500荧光定量PCR仪上。
07 开始核酸扩增检测
在电脑上设置PCR反应条件，运行仪器，开始核酸扩增检测。
08 检测完成
实时关注检测情况，大约1.5小时后，核酸扩增完成，进行检测结果判读。至此，该样本的新型冠状病毒核酸检测就算完成了，整个流程大概4小时。
拱北海关珠海保健中心建有“国家新发传染病检测重点实验室”，是生物安全二级实验室，并通过了国家CMA 认证和 CNAS 认可。该实验室已建立的方法以及储备的试剂可开展100多种病原体的监测和应急检测，在珠海各口岸的传染病疫情防控中发挥着重要作用。

武汉出现新冠肺炎后，实验室技术团队迅速反应。就在1月11日，新型冠状病毒核酸序列公布的当天，莫秋华博士和汪海波博士就设计合成了新型冠状病毒（2019-nCoV）的检测引物和探针，建立了检测方法，同时购置了商品化试剂盒，提前做好病毒核酸检测准备。疫情暴发后，他们更是全天值守，与口岸一线关员协同作战。目前，已完成了300余份旅客样品的检测。

供稿：拱北海关
编辑：常相婧
发布：朱秀亮
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